1  “温度对酶活性的影响”实验中指示剂的选择

1.1  争议一：该实验能否选用斐林试剂作指示剂？

1.1.1  不能用斐林试剂作指示剂

    常正良[湖南省衡阳县第三中学（421200）]：本实验通过用碘液检验底物淀粉是否存在来推测温度是否对酶活性有影响，能否用斐林试剂检验是否有还原糖生成来推测温度是否影响酶的活性？笔者认为，不能。因为实验目的是观察不同温度对酶活性的影响，如果选用斐林试剂作指示剂，需要在试剂加入后进行水浴加热，这样检测过程中就已经改变了原来三只试管的温度条件，所指示的结果也就难于保证就能代表原来的三种温度条件下真实的实验结果。例如，在加热过程中，原来处于0 ℃（冰水中）的那支试管中的淀粉酶就不再处于0 ℃条件下了，在温度逐渐升高的过程中，酶的活性有可能恢复，催化淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，这支试管中也会出现少量砖红色沉淀！这样，实验结果就不真实了。因此，在“温度对酶活性的影响”实验中，只能选用碘液作指示剂，不能选用斐林试剂作指示剂。

    曾鹏光[广东省揭阳市揭东县登岗中学（515558）]：本实验不能用斐林试剂作鉴定试剂，因为使用斐林试剂需要水浴煮沸，3号试管是低温处理，酶没有失活，加入斐林试剂后，在由0℃～100℃加热过程中，淀粉酶会恢复活性，催化淀粉水解，产生麦芽糖等还原性糖，也生成了砖红色沉淀，无法说明低温是否对酶活性有影响。

    王学宏[河南西华第一高级中学（466600）]：该实验的检测试剂只能用碘液而不能用斐林试剂，因为使用斐林试剂需水浴煮沸，这样0℃的实验组是低温处理，酶没有失活，加入斐林试剂后，在由0℃～100℃加热过程中很可能会造成淀粉水解，也生成砖红色沉淀。如此就无法说明低温是否对酶活性有影响。因此该实验不能用斐林试剂作鉴定试剂，只能选择碘液。

1.1.2  可以用斐林试剂作指示剂

    彭邦凤[湖北省恩施清江外国语学校（445000）]：如果仅从检测反应是否进行的角度来选择，选用碘液和斐林试剂两种试剂均可。就教材三个温度而言，选择斐林试剂进行鉴定，可以看到条件为0℃的试管中生成砖红色沉淀极少，条件为100℃的试管中无砖红色沉淀生成，条件为60℃的试管中砖红色沉淀生成较多，得出结论，酶的作用需要适宜温度。至于上面三位老师提出的，随温度升高，酶活性恢复的问题应该不会出现，由于所加斐林试剂碱性较强，会导致淀粉酶变性失活，鉴定过程中反应不会进行；同时，即便是有少许还原糖生成，也并不影响实验结论的得出，甚至还能更好地说明温度对酶活性的影响——低温降低酶活性，随温度升高酶活性增强，高温导致酶失活，酶的作用需要适宜的温度。

    常正良：彭老师指出，如果用斐林试剂作指示剂，由于斐林试剂碱性较强，会导致酶变性失活，因而不会出现笔者提出的0℃的那支试管随着温度升高，酶活性恢复的问题，这确实很有道理。笔者又特意查了一下，斐林试剂甲液是0.1g/mL的NaOH溶液；而在原教材“pH对酶活性的影响”实验中，加入的NaOH溶液浓度为5%，应该就是0.05g/mL的NaOH溶液吧。这样看来，斐林试剂甲液与乙液混合均匀后应该仍有较强的碱性，起码不会比0.05g/mL的NaOH溶液的碱性弱。既然0.05g/mL的NaOH溶液都能使淀粉酶失去活性，那么斐林试剂能使淀粉酶变性失活也就没有什么好奇怪的了。因此，笔者愿意放弃原来的意见，转而支持彭老师提出的“在教材所选温度0 ℃（冰水中）、60 ℃和100 ℃（沸水中）的条件下，可以选用斐林试剂作为指示剂”的观点。

    至于彭老师提出的0 ℃的那只试管中“即便是有少许还原糖生成，也并不影响实验结论的得出，甚至还能更好地说明温度对